絕大多數(shù)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)人員頭疼的問(wèn)題，莫過(guò)于試驗(yàn)成果不抱負(fù)。其實(shí)做科研試驗(yàn)，就是這樣在不斷探究中尋求真理。很難有人可以的試驗(yàn)成功。一旦出現(xiàn)“花板"，實(shí)驗(yàn)結(jié)果必須放棄，重新進(jìn)行，不僅浪費(fèi)物料和時(shí)間，而且還會(huì)出現(xiàn)樣本量缺少、交叉污染、報(bào)告延遲等一系列問(wèn)題。

影響因素分析如下：

一、標(biāo)本因素

正確處理標(biāo)本，防止大規(guī)模溶血、血漿層異物、使用一次性加樣槍頭，防止交叉污染。血清和血漿均可以用于檢測(cè)，但血清的分離應(yīng)在抽血后等血液凝固后再離心。

二、試劑因素

正確保存及使用有效試劑。使用過(guò)期試劑及底物接觸金屬容器、底物混合后放置時(shí)間較長(zhǎng)均影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。選擇試劑時(shí)應(yīng)選擇靈敏度高、特異性好、穩(wěn)定性好，批間差小的試劑。不同廠(chǎng)家的試劑不能混用，包括底物和洗滌液。檢測(cè)前應(yīng)將試劑放置室溫平衡半小時(shí)，洗滌液應(yīng)現(xiàn)用現(xiàn)配，同時(shí)觀察濃縮洗滌液中有無(wú)結(jié)晶，若有結(jié)晶應(yīng)放37℃水浴中融化后才可使用。

三、技術(shù)人員操作因素

嚴(yán)格按照相關(guān)實(shí)驗(yàn)SOP操作實(shí)驗(yàn)。加樣時(shí)應(yīng)盡可能的垂直加樣，并加在包被孔的底部（注：勿應(yīng)用力過(guò)度破壞底部包被物質(zhì)），不可加在孔的上部及外部。

四、洗板機(jī)的因素

ELISA試劑盒廢液瓶裝滿(mǎn)后應(yīng)及時(shí)清空，以防止廢液回流對(duì)管道的污染，而使洗滌不，造成“花板"。洗板結(jié)束后應(yīng)用蒸餾水清洗管道，以防止廢液在管道中的殘留。同時(shí)應(yīng)根據(jù)儀器維護(hù)保養(yǎng)程序，定期對(duì)洗板機(jī)進(jìn)行維護(hù)保養(yǎng)。

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